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土壤高速冷冻离心机在土壤DNA提取中的应用

更新时间:2022-11-08 点击量:1594
  使用土壤高速冷冻离心机的所有转头都具有转头自锁功效,能够轻松装卸,同时所有转头都能够高温高压灭菌,包管了使用者的清静性 。
  
  土壤高速冷冻离心机详细提取土壤DNA的办法:
  
  一、土壤样本预处置惩罚:
  
  1、取500mg土壤样本至研磨管中 。
  
  2、加入980µL缓冲液,轻柔涡旋混匀 。
  
  3、加入120μL裂解液 。
  
  4、将研磨管置于研磨仪中,40Hz处置惩罚40sec 。
  
  5、12000rpm离心5min,沉淀碎片颗粒 。
  
  6、转移上清液至2mL离心管中 。加入250μL去卵白液,手摇动晃混匀 。4℃安排5min 。
  
  7、12000rpm离心3min,之后取未几于900μL上清液,转移至2mL离心管中 。
  
  8、加入1/3体积的团结液,轻柔涡旋混匀 。4℃安排5min 。
  
  9、12000rpm室温离心1min 。转移上清液至5mL离心管中 。
  
  10、加入1.5倍体积的缓冲液,连忙奏乐混匀 。
  
  二、DNA提� 。�
  
  1、将DNA吸附柱套入2mL网络管中,备用 。
  
  2、将预处置惩罚混淆液加入到DNA吸附柱中,12,000rpm室温离心1min,弃掉废液 。
  
  3、将DNA吸附柱放接纳集管,加入600µL漂洗液,12,000rpm室温离心30sec,弃废液 。
  
  4、重复一遍办法3 。
  
  5、将DNA吸附柱放接纳集管,空柱12,000rpm离心2min,以除去残留的漂洗液 。
  
  6、将DNA吸附柱放入新的清洁1.5mL离心管中,在滤膜中央加入30-100µL洗脱液,室温安排3min 。然后12,000rpm离心1min,网络滤液即为样本DNA 。
  
  7、DNA样品可置于-20℃短期生涯,-80℃恒久生涯 。

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